Аргинин.Ру - всё об аргинине  
В начало
Контакты
Рекламодателям
 


молекула L-arginine
молекула L-arginine

Нобелевские лауреаты 1998 года:

Ф.Ферчготт

Л.Игнарро

Ф.Мурад

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Про аргинин:

Что такое аргинин?
Откуда берется аргинин?
Механизм действия.

Аргинин в медицине:

Сердечная недостаточн.
Стенокардия
Гипертония
Онкология (рак)
Геронтология (старение)
Атеросклероз
Травмы
Ожоги
Гормональный обмен
ВИЧ/СПИД

Где купить аргинин

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Библиотека статей:




Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_base has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 21

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_client has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 615

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_context has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1177

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_articles has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1529

Warning: Use of undefined constant _SAPE_USER - assumed '_SAPE_USER' (this will throw an Error in a future version of PHP) in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1090
Авторы: Amiss TJ, Sherman DB, Nycz CM, Andaluz SA, Pitner JB.
Дата:2007 год, сентябрь.

Engineering and rapid selection of a low-affinity glucose/galactose-binding protein for a glucose biosensor.

  автоматический перевод
Periplasmic expression screening is a selection technique used to enrich high-affinity proteins in Escherichia coli. We report using this screening method to rapidly select a mutated D-glucose/D-galactose-binding protein (GGBP) having low affinity to glucose. Wild-type GGBP has an equilibrium dissociation constant of 0.2 microM and mediates the transport of glucose within the periplasm of E. coli. The protein undergoes a large conformational change on binding glucose and, when labeled with an environmentally sensitive fluorophore, GGBP can relay glucose concentrations, making it of potential interest as a biosensor for diabetics. This use necessitates altering the glucose affinity of GGBP, bringing it into the physiologically relevant range for monitoring glucose in humans (1.7-33 mM). To accomplish this a focused library was constructed using structure-based site-saturation mutagenesis to randomize amino acids in the binding pocket of GGBP at or near direct H-bonding sites and screening the library within the bacterial periplasm. After selection, equilibrium dissociation constants were confirmed by glucose titration and fluorescence monitoring of purified mutants labeled site-specifically at E149C with the fluorophore IANBD (N,N'-dimethyl-N-(iodoacetyl)-N'-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)ethylene-diamine). The screening identified a single mutation A213R that lowers GGBP glucose affinity 5000-fold to 1 mM. Computational modeling suggested the large decrease in affinity was accomplished by the arginine side chain perturbing H-bonding and increasing the entropic barrier to the closed conformation. Overall, these experiments demonstrate the ability of structure-based site-saturation mutagenesis and periplasmic expression screening to discover low-affinity GGBP mutants having potential utility for measuring glucose in humans   Periplasmic выражения отбора является выбор метода, используемых для обогащения высокого сродство белков в Эшерихия титр. Мы отчет, используя этот метод для скрининга быстро выбрать мутировавший D-glucose/D-galactose-binding белка (GGBP), имеющих низкие близость к глюкозе. Wild-типа GGBP имеет равновесия Константа диссоциации в 0,2 microM и посредника транспорта глюкозы в periplasm Е. коли. В протеина проходит большое конформационные изменения по обязательным глюкозы, и, когда с символикой экологически чувствительных fluorophore, GGBP может реле концентрации глюкозы, в результате чего он, потенциальный интерес в качестве биосенсоров для диабетиков. Такое применение требует изменения глюкозы близость GGBP, в результате чего она в физиологически соответствующего ассортимента для мониторинга уровня глюкозы в организме человека (1.7-33 мМ). Для достижения этой целенаправленной библиотека была построена с использованием структуры на базе веб-насыщения мутагенез в случайном порядке аминокислот в обязательный кармане GGBP на или вблизи непосредственного H-склеивание объектов и проверки библиотеки в бактериальных periplasm. После отбора, равновесие диссоциации константы были подтверждены глюкозы титрования и флуоресценции мониторинг очищенных мутантов помечены сайты, специально на E149C с fluorophore IANBD (N, N'-диметил-N-(iodoacetyl)-N '- (7-nitrobenz-2 - oxa-1 ,3-diazol-4-ил) этилен-диамина). Проверка выявила одной мутации A213R, что снижает GGBP глюкозы сродство 5000-раз до 1 мМ. Вычислительного моделирования предложено большое сокращение близость была на стороне аргинина цепи волнующая H-склеивание и повышения entropic барьер для закрытых конформацию. В общем, эти эксперименты демонстрируют способность структуру на основе веб-насыщения мутагенеза и periplasmic выражения проверки обнаружить низким уровнем близости GGBP мутантов, имеющих потенциальную полезность для измерения глюкозы в организме человека

к списку статей за 2007 год (en)

в библиотеку