Аргинин.Ру - всё об аргинине  
В начало
Контакты
Рекламодателям
 


молекула L-arginine
молекула L-arginine

Нобелевские лауреаты 1998 года:

Ф.Ферчготт

Л.Игнарро

Ф.Мурад

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Про аргинин:

Что такое аргинин?
Откуда берется аргинин?
Механизм действия.

Аргинин в медицине:

Сердечная недостаточн.
Стенокардия
Гипертония
Онкология (рак)
Геронтология (старение)
Атеросклероз
Травмы
Ожоги
Гормональный обмен
ВИЧ/СПИД

Где купить аргинин

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Библиотека статей:




Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_base has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 21

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_client has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 615

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_context has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1177

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_articles has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1529

Warning: Use of undefined constant _SAPE_USER - assumed '_SAPE_USER' (this will throw an Error in a future version of PHP) in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1090
Авторы: Sacchi S, Rosini E, Molla G, Pilone MS, Pollegioni L.
Дата:2004 год, июнь.

Modulating D-amino acid oxidase substrate specificity: production of an enzyme for analytical determination of all D-amino acids by directed evolution.

  автоматический перевод
Recent research on the flavoenzyme D-amino acid oxidase from Rhodotorula gracilis (RgDAAO) has revealed new, intriguing properties of this catalyst and offers novel biotechnological applications. Among them, the reaction of RgDAAO has been exploited in the analytical determination of the D-amino acid content in biological samples. However, because the enzyme does not oxidize acidic D-amino acids, it cannot be used to detect the total amount of D-amino acids. We now present the results obtained using a random mutagenesis approach to produce RgDAAO mutants with a broader substrate specificity. The libraries of RgDAAO mutants were generated by error-prone PCR, expressed in BL21(DE3)pLysS Escherichia coli cells and screened for their ability to oxidize different substrates by means of an activity assay. Five random mutants that have a 'modified' substrate specificity, more useful for the analytical determination of the entire content of D-amino acids than wild-type RgDAAO, have been isolated. With the only exception of Y223 and G199, none of the effective amino acid substitutions lie in segments predicted to interact directly with the bound substrate. The substitutions appear to cluster on the protein surface: it would not have been possible to predict that these substitutions would enhance DAAO activity. We can only conclude that these substitutions synergistically generate small structural changes that affect the dynamics and/or stability of the protein in a way that enhances substrate binding or subsequently catalytic turnover.   Недавние исследования по flavoenzyme D-аминокислот оксидазы из Rhodotorula тонкой (RgDAAO) выявил новых интригующих свойства этого катализатора, и предлагает новые биотехнологических приложений. Среди них, реакция RgDAAO было использовать в аналитической определения Д-аминокислот содержания в биологических образцах. Вместе с тем, поскольку фермент не окислять кислой D-аминокислот, оно не может быть использовано для определения общего объема D-аминокислот. Мы в настоящее время результаты, полученные с помощью случайных мутагенез подход производить RgDAAO мутантов с более широким субстрата специфика. В библиотеках RgDAAO мутантов были порожденных ошибок ПЦР, выраженное в BL21 (DE3) pLysS Эшерихия титр клеток и проверенной на их способность окислять различные субстраты на основе анализа деятельности. Пять случайных мутантов, что является "изменение" субстрата специфику, более полезным для аналитического определения всего содержания D-аминокислот, чем дикого RgDAAO, были изолированы. С единственным исключением Y223 и G199, ни один из эффективных аминокислотных замен находятся в слоях предсказывали взаимодействовать напрямую связаны с подложкой. В замен, как к группе на поверхности белка: он не был бы возможным прогнозировать, что эти замены позволит повысить DAAO деятельности. Мы можем лишь заключить, что эти замены синергетически создавать небольшие структурные изменения, которые влияют на динамику и / или стабильности белка, таким образом, чтобы повысить субстрата обязательного или впоследствии стимулирующую оборот.

к списку статей за 2004 год (en)

в библиотеку