Аргинин.Ру - всё об аргинине  
В начало
Контакты
Рекламодателям
 


молекула L-arginine
молекула L-arginine

Нобелевские лауреаты 1998 года:

Ф.Ферчготт

Л.Игнарро

Ф.Мурад

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Про аргинин:

Что такое аргинин?
Откуда берется аргинин?
Механизм действия.

Аргинин в медицине:

Сердечная недостаточн.
Стенокардия
Гипертония
Онкология (рак)
Геронтология (старение)
Атеросклероз
Травмы
Ожоги
Гормональный обмен
ВИЧ/СПИД

Где купить аргинин

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Библиотека статей:




Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_base has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 21

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_client has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 615

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_context has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1177

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_articles has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1529

Warning: Use of undefined constant _SAPE_USER - assumed '_SAPE_USER' (this will throw an Error in a future version of PHP) in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1090
Авторы: Raina K, Panda AK, Ali MM, Talwar GP.
Дата:2004 год, сентябрь.

Purification, refolding, and characterization of recombinant LHRH-T multimer.

  автоматический перевод
To make the native LHRH immunogenic, a multimer of LHRH interspersed with T non-B peptides (r-LHRH-d2) was expressed as recombinant protein in Escherichia coli. The expression level of the recombinant protein was around 15% of the total cellular protein and it aggregated as inclusion bodies. Inclusion bodies from the bacterial cells were isolated and purified to homogeneity. Instead of high concentrations of chaotropic agents, r-LHRH- d2 was solubilized in 50 mM citrate buffer at pH 3 containing 2 M urea. The protein was refolded by 5-fold dilution (pulsatile) with cold 10 mM citrate buffer at pH 6 in presence of 0.3 M L-arginine. Purification of r-LHRH-d2 was carried out by successive passages on CM-Sepharose column at pH 6.0 which retained extraneous proteins and pH 4.8 at which r-LHRH-d2 bound to the resin. The elution was carried out by using linear salt gradient (0.1-1 M NaCl). The overall yield of the purified r-LHRH-d2 was 40% of the initial inclusion body proteins. The purity and homogeneity were confirmed by a single homogeneous peak on analytical HPLC eluting out at 29.51 min and by single band on SDS-PAGE reactive with polyvalent anti-LHRH antibodies. Mass spectroscopic analysis indicated the protein to be of 16.6 kDa which equals the theoretically expected mass. The N-terminal amino acid analysis of r-LHRH-d2 showed the sequence which corresponded to the designed protein. The CD spectrum of the refolded r-LHRH-d2 showed that the multimer has considerable beta sheet structure like the monomeric LHRH protein.   Для того чтобы сделать родной LHRH иммуногенность, multimer один из LHRH перемежаться с Т, не-В пептидов (р-LHRH-d2) была выражена, как рекомбинантного белка в Эшерихия титр. Выражение уровня рекомбинантного белка составляет около 15% от общего числа сотовых белка и агрегирования, как включение органов. Включение органов из бактериальных клеток были изолированы и чистый до однородности. Вместо высоких концентраций chaotropic агентов, р-LHRH-d2 было solubilized в 50 мМ цитрат буфера при рН 3, содержащий 2 M мочевины. В белок refolded в 5 раз разбавления (ударные), с холодной 10 мМ цитрат буфера при рН 6, в присутствии 0,3 М L-аргинина. Очистка р-LHRH-d2 была проведена последовательных проходов на CM-Sepharose колонке при рН 6,0, сохраняющим посторонних белков и рН 4,8, на которой р-LHRH-d2 обязаны смолы. В elution был осуществлен с помощью линейного градиента соли (0.1-1 М NaCl). Общая урожайность очищенного р-LHRH-d2 составляла 40% от первоначального включения тела белков. В чистоте и однородности были подтверждены какой-либо однородной пик по аналитической ВЭЖХ из eluting на 29,51 мин и одиночными полосе на SDS-СТРАНИЦЫ реагирующие с поливалентных анти-LHRH антител. Масса спектроскопических анализ показал, белка, чтобы быть 16,6 кДа, которые равняется теоретически ожидать массового. В N-терминал аминокислоты анализ р-LHRH-d2 свидетельствует о последовательности, которая соответствует заданной белка. На диске слоев refolded р-LHRH-d2 показали, что multimer обладает значительным бета-листа структуры, как мономерных LHRH белка.

к списку статей за 2004 год (en)

в библиотеку