Аргинин.Ру - всё об аргинине  
В начало
Контакты
Рекламодателям
 


молекула L-arginine
молекула L-arginine

Нобелевские лауреаты 1998 года:

Ф.Ферчготт

Л.Игнарро

Ф.Мурад

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Про аргинин:

Что такое аргинин?
Откуда берется аргинин?
Механизм действия.

Аргинин в медицине:

Сердечная недостаточн.
Стенокардия
Гипертония
Онкология (рак)
Геронтология (старение)
Атеросклероз
Травмы
Ожоги
Гормональный обмен
ВИЧ/СПИД

Где купить аргинин

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Библиотека статей:




Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_base has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 21

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_client has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 615

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_context has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1177

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_articles has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1529

Warning: Use of undefined constant _SAPE_USER - assumed '_SAPE_USER' (this will throw an Error in a future version of PHP) in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1090
Авторы:Yang M, Kirley TL.
Дата:2004 год, июль.

Site-directed mutagenesis of human soluble calcium-activated nucleotidase 1 (hSCAN-1): identification of residues essential for enzyme activity and the Ca(2+)-induced conformational change.

  автоматический перевод
Human soluble calcium-activated nucleotidase 1 (hSCAN-1) is the human homologue of soluble apyrases found in blood-sucking insects. This family of nucleotidases is unrelated in sequence to more well-studied nucleotidases, and very little is known about the enzymatic mechanism. By multiple sequence alignment, eight regions that are highly conserved in the hSCAN-1 family were identified and named. To identify amino acids important for catalytic activity and enzyme specificity, seven point mutations were constructed, expressed in bacteria, refolded, purified, and characterized. Substitution of glutamic acid 130 with tyrosine resulted in dramatically increased nucleotidase activities, while mutagenesis of aspartic acid 151 to alanine and aspartic acid 84 to alanine completely abolished activity. Mutagenesis of arginine 133 and arginine 271 resulted in enzymes with very little nucleotidase activity. Mutagenesis of aspartic acid 175 to alanine and glycine 122 to glutamic acid had smaller negative effects on enzyme activities. Previously, our laboratory showed that calcium triggers a conformational change in hSCAN-1 necessary for nucleotidase activity. Here we show that several mutants (D84A, R133A, and D151A) that lost most of their activity were unable to undergo the conformational change induced by Ca(2+), as shown by Cibacron blue binding, limited proteolysis, and tryptophan fluorescence. We conclude that aspartic acid residues 84 and 151, as well as arginine residue 133, are essential for the Ca(2+)-induced conformational change that is necessary for enzyme activity. Aspartic acid 175 and glutamic acid 130 are important for determining substrate specificity. In addition, we show that Sr(2+), unlike Mg(2+) and other divalent cations, can substitute for Ca(2+) to induce the conformational change necessary for enzyme activity. However, Sr(2+) cannot substitute for Ca(2+) to support nucleotide hydrolysis, presumably because Sr(2+) cannot substitute for Ca(2+) in its second role as a nucleotide cosubstrate. The ramifications of our results on the interpretation of a recently published crystal structure are discussed. This information will facilitate future engineering of this enzyme designed to enhance its ability to hydrolyze ADP and thus increase its potential for therapeutic use in the treatment of pathological ischemic events triggered via activation of platelets by ADP.   Правам растворимого кальция активируется nucleotidase 1 (hSCAN-1) является человек homologue растворимых apyrases найти в кровососущих насекомых. Это семейство nucleotidases никак не в последовательности более хорошо изученных nucleotidases, и очень мало известно о ферментативного механизма. В нескольких последовательность согласования, восемь регионов, которые в значительной степени сохраняется в hSCAN-1 семьи были определены и названы. Для определения аминокислот важна для каталитической активности и специфичности фермента, семь точка мутации были построены, выраженное в бактерии, refolded, очищенных и характерны. Замена glutamic кислота 130 с тирозинкиназ привело к резкому увеличению nucleotidase деятельности, в то время как мутагенез из аспарагиновой кислоты 151 на аланин и аспарагиновой кислоты до 84 аланин полностью отменена деятельности. Мутагенез из аргинина 133 и аргинина приводит к 271 ферментов с очень мало nucleotidase деятельности. Мутагенез из аспарагиновой кислоты 175 до аланин и глицин 122 до glutamic кислоты было меньше негативных последствий для деятельности ферментов. Ранее, нашей лаборатории показали, что кальций вызывает конформационные изменения в hSCAN-1, необходимые для nucleotidase деятельности. Здесь мы показываем, что несколько мутантов (D84A, R133A, и D151A), который потерял большую часть своей деятельности, не смогли пройти конформационных изменений, вызванных Са (2 +), как показано на Cibacron синий обязательный характер, ограниченный протеолиза, и флуоресценции триптофана. Мы пришли к выводу, что остатки аспарагиновой кислоты 84 и 151, а также остатков аргинина 133, имеют важное значение для Са (2 +)-индуцированных конформационных изменений, которые необходимы для ферментной активности. Аспарагиновой кислоты 175 и glutamic кислота 130 имеют важное значение для определения субстрата специфика. Кроме того, мы показываем, что Sr (2 +), в отличие от Мг (2 +) и других divalent катионы, могут заменить Са (2 +), чтобы побудить конформационные изменения, необходимые для ферментной активности. Однако, Sr (2 +), не может заменить Са (2 +), чтобы поддержать гидролиза нуклеотидов, предположительно потому, что Sr (2 +), не может заменить Са (2 +), в своей второй роли в нуклеотидных cosubstrate. Последствия наших результатов по толкованию недавно опубликованном кристаллической структуры рассматриваются. Эта информация будет способствовать в будущем инженерных этого фермента, направленных на укрепление ее способности hydrolyze ADP и тем самым увеличить свой потенциал для терапевтического использования в лечении патологических ишемического события вызвали через активацию тромбоцитов к АДФ.

к списку статей за 2004 год (en)

в библиотеку