Аргинин.Ру - всё об аргинине  
В начало
Контакты
Рекламодателям
 


молекула L-arginine
молекула L-arginine

Нобелевские лауреаты 1998 года:

Ф.Ферчготт

Л.Игнарро

Ф.Мурад

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Про аргинин:

Что такое аргинин?
Откуда берется аргинин?
Механизм действия.

Аргинин в медицине:

Сердечная недостаточн.
Стенокардия
Гипертония
Онкология (рак)
Геронтология (старение)
Атеросклероз
Травмы
Ожоги
Гормональный обмен
ВИЧ/СПИД

Где купить аргинин

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Библиотека статей:




Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_base has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 21

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_client has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 615

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_context has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1177

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_articles has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1529

Warning: Use of undefined constant _SAPE_USER - assumed '_SAPE_USER' (this will throw an Error in a future version of PHP) in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1090
Авторы:Richter W, Hermsdorf T, Kronbach T, Dettmer D.
Дата:2002 год, июнь.

Refolding and purification of recombinant human PDE7A expressed in Escherichia coli as inclusion bodies.

  автоматический перевод
We have investigated the refolding and purification of the catalytic domain of human 3',5'-cyclic nucleotide phosphodiesterase 7A1 (PDE7A1) expressed in Escherichia coli. A cDNA encoding an N-terminal-truncated PDE7A1(147-482-His) was amplified by RT-PCR from human peripheral blood cells and inserted into the vector pET21-C for bacterial expression of the enzyme fused to a C-terminal His-tag. The PDE was found to be expressed in the form of inclusion bodies which could be refolded to an active enzyme in buffer containing high concentrations of arginine hydrochloride, ethylene glycol, and magnesium chloride at pH 8.5. The PDE7A1(147-482-His) construct could be purified after dialysis and concentration steps by either Zn2+-IDA-Sepharose chromatography or ResourceQ ion-exchange chromatography to homogeneity. In comparison to the metal-chelate column, the ResourceQ purification resulted in a distinctly better yield and enrichment of the protein. Both the Vmax (0.46 micromol. min(-1). mg(-1) ) and the K(m) (0.1 microM) of the purified enzyme were found to be comparable with published data for native or recombinant catalytically active expressed PDE7A1. Using SDS/PAGE, a molecular mass of 39 kDa was determined (theoretical value 38.783 kDa). As known from several other mammalian PDEs, size-exclusion chromatography using refolded PDE7A1(147-482-His) indicated the formation of dimers. The purified enzyme was soluble at concentrations up to 100 microg/ml. A further increase of protein concentration resulted, however, in precipitation of the enzyme. Copyright 2002 Elsevier Science (USA).   Мы расследовали refolding и очистки каталитического домена человека 3 ', 5'-циклических нуклеотидов phosphodiesterase 7A1 (PDE7A1), выраженной в Эшерихия титр. A cDNA кодирования N-терминал-усеченный PDE7A1 (147-482-его) был усилен RT-ПЦР из человеческой клетки периферической крови и вставляется в вектор pET21-C для выражения бактериального фермента плавленый к C-терминала Его - Тег. В д.у. было установлено быть выражены в виде включения органов, которые могли бы быть refolded для активного фермента в буферной содержащих высокие концентрации аргинина гидрохлорид, этилен гликоль и хлористый магний при рН 8,5. В PDE7A1 (147-482-Его) строительство может быть очищен после диализа и концентрации действия либо Zn2 +-МАР-Sepharose хроматографии или ResourceQ ионообменных хроматографии на однородность. По сравнению с металлическими-chelate колонке, то ResourceQ очистки привело к явно лучше доходность и обогащение белка. Как Vmax (0,46 micromol. Мин (-1). Мг (-1)) и K (м) (0,1 microM) от очищенного фермента, оказались сопоставимы с опубликованными данными для родных или рекомбинантный каталитически активных выразил PDE7A1. Использование СДП / СТРАНИЦЫ, молекулярной массой 39 кДа была определена (теоретическое значение 38,783 кДа). Как известно из ряда других млекопитающих уравнений в частных производных, размер-изоляции с использованием хроматографии refolded PDE7A1 (147-482-Его) свидетельствуют о формировании димеров. В очищенный фермент был растворим в концентрациях до 100 мкг / мл. А дальнейшее повышение концентрации белка приводит, однако, в осадках из ферментов. Copyright 2002 Elsevier Science (США).

к списку статей за 2002 год (en)

в библиотеку