Аргинин.Ру - всё об аргинине  
В начало
Контакты
Рекламодателям
 


молекула L-arginine
молекула L-arginine

Нобелевские лауреаты 1998 года:

Ф.Ферчготт

Л.Игнарро

Ф.Мурад

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Про аргинин:

Что такое аргинин?
Откуда берется аргинин?
Механизм действия.

Аргинин в медицине:

Сердечная недостаточн.
Стенокардия
Гипертония
Онкология (рак)
Геронтология (старение)
Атеросклероз
Травмы
Ожоги
Гормональный обмен
ВИЧ/СПИД

Где купить аргинин

аргинин по 1000 мг 90 капсул производства Solgar

Библиотека статей:




Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_base has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 21

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_client has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 615

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_context has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1177

Deprecated: Methods with the same name as their class will not be constructors in a future version of PHP; SAPE_articles has a deprecated constructor in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1529

Warning: Use of undefined constant _SAPE_USER - assumed '_SAPE_USER' (this will throw an Error in a future version of PHP) in /home/ih72672/public_html/arginine.ru/1152e72650d4093c1a42c7534a7d7797/sape.php on line 1090
Авторы: Vernia S, Sanz-Gonzalez SM, Lopez-Garcia MP.
Дата:2001 год, октябрь.

Involvement of peroxynitrite on the early loss of p450 in short-term hepatocyte cultures.

  автоматический перевод
The biological chemistry of nitric oxide (NO) in the oxygenated cellular environment is extremely complex. It involves the direct interaction of NO with specific biomolecules and the so-called indirect effects, due to secondary more potent oxidant species derived from NO which are also able to react with DNA, lipids, thiols and transition metals (Wink et al., 1996; Nathan, 1992). In addition to its regulatory role as a signalling molecule (Nathan, 1992; Moncada and Palmer, 1991) it has become evident that NO (or NO-derived species) is a critical factor involved in various toxicological mechanisms (Wink et al., 1996; Wang et al., 1998; Estevez et al., 1999; Wink et al., 1999). Some controversy exists however about the damaging vs. protective actions of NO on oxidative injury, whose biological significance in living cells and tissues remains still ill defined. Research in this laboratory (Lopez-Garcia, 1998; Lopez-Garcia and Sanz-Gonzalez, 2000) has shown that NO synthesis is significantly activated in hepatocytes from control rats following isolation by the classical collagenase-based procedure. NO overproduction appears to be due to the very early activation of liver constitutive Ca2+-dependent NO synthase (cNOS). Previous results have also provided first experimental evidence for the direct involvement of endogenously generated NO as a causal factor responsible for important phenotypic changes commonly observed in short-term cultured hepatocytes, which includes the early impairment of hepatocyte mitochondrial function--i.e., transient cell energy depletion--and glucose metabolism, and the well-known quick and irreversible loss of P450 content (Lopez et al. 1987; Lopez-Garcia, 1998). This study aims to further characterise the mechanisms underlying this phenomenon. Results show that the hepatocyte isolation procedure (the commonly employed collagenase-based two step liver perfusion method) induces strong oxidative stress that lasts for at least 4 h in culture and involves both oxygen-derived (ROS) and nitrogen-derived (RNS) reactive species. On the basis of the combined use of dihydrorhodamine 123 (DHR) as a probe and L-NAME (N(G)-nitro-L-arginine methyl ester) to efficiently block NO synthesis, the analysis of the amount, the time-course pattern, and the nature of the species involved support the view that peroxynitrite* (PN) is readily formed within the early culture hours. Immunodetection of protein bound 3-nitrotyrosine provides direct evidence for PN generation upon hepatocyte isolation: several nitrated protein bands--most already present after only 30 min of liver perfusion and quantitatively increasing for the first 2 hours in culture--have been identified as preferential PN protein targets in the different cellular compartments. Since the early inhibition of NO synthesis is enough to provide full maintenance of the hepatocyte initial P450 content, results support the view that PN--while not affecting cell viability and monolayer development--is the main species likely responsible for the early loss of P450 in short-term cultured hepatocytes.   Биологическая химия оксида азота (NO) в окисленном сотовой окружающей среды является чрезвычайно сложной. Он предполагает прямое взаимодействие NO с конкретными биомолекул и так называемые косвенные последствия, в связи с более мощным вторичных окислителей видов, полученных в результате NO, которые также могут вступать в реакцию с ДНК, липиды, thiols и переходных металлов (Подмигнуть и др., 1996 ; Натан, 1992). В дополнение к своей регулирующей роли в качестве сигнальных молекул (Натан, 1992; Монкада и Palmer, 1991), то стало очевидно, что НЕТ (NO-либо полученных видов) является одним из важнейших факторов, участвующих в различных токсикологических механизмов (Подмигнуть и др., 1996 ; Ван и др.., 1998; Эстевес и др., 1999; Подмигнуть и др., 1999). Некоторые разногласия существуют Однако по поводу повреждения против защитного действия NO на окислительные повреждения, чье биологическое значение в жизни клеток и тканей, остается еще недостаточно четко определены. Исследования в этой лаборатории (Лопес Гарсия, 1998; Лопес-Гарсия и Гонсалес-Санс, 2000) показал, что синтез NO значительно активизирован в гепатоцитах с контролем крыс после изоляции на классическом collagenase основе процедуры. NO перепроизводство, как представляется, из-за очень рано активации печени учредительных Ca2 +-зависимых NO синтазы (cNOS). Предыдущие результаты также предоставили первые экспериментальные доказательства прямого участия endogenously порожденных NO как причинным фактором, ответственным за важные фенотипических изменений обычно наблюдается в краткосрочной культивируемых гепатоцитов, в которую входят первые нарушения гепатоцитов митохондриальной функции - например, переходных клеток энергии истощение - и метаболизм глюкозы, а также хорошо известные быстрой и необратимой утрате P450 содержания (Лопес и др.. 1987; Лопес-Гарсиа, 1998). Это исследование имеет целью дальнейшего описания механизмов, лежащих в основе этого явления. Результаты свидетельствуют о том, что гепатоцитов изоляции процедуры (в обычно применяемых collagenase ориентированного на два шага печени перфузии метод) вызывает сильной окислительного стресса, что длится, по крайней мере, 4 часа в культуре и включает как кислорода, полученных (РОС), и азота, полученных (RNS) реактивного видов. На основе комплексного использования dihydrorhodamine 123 (ОЛР), в качестве датчика и L-NAME (N (G)-нитро-L-аргинина метиловый эфир) для эффективного блока NO обобщение, анализ суммы, на время курса структуры, и характер этих видов, подтверждают точку зрения о том, что пероксинитрита * (PN) легко формируются в раннем культуры часов. Immunodetection белка обязательность 3-nitrotyrosine предоставляет прямые доказательства PN поколения на гепатоцитов изоляции: несколько nitrated белка полосы - большинство уже спустя 30 мин перфузии печени, и в количественном, увеличение за первые 2 часа в культуре - были определены как преференциальные PN мишеней в различных сотовых отсеков. С начала ингибирование синтеза NO является достаточным для обеспечения полного обслуживания из гепатоцитов первоначальный P450 содержание, результаты поддерживают мнение о том, что PN - хотя и не затрагивающих жизнеспособность клеток и монослоя развития - это основной вид, вероятно, ответственных за первые потери P450 в краткосрочной культивируемых гепатоцитов.

к списку статей за 2001 год (en)

в библиотеку